本药抗菌谱与磺胺甲基异噁唑相似，而抗菌作用比磺胺甲基异噁唑强20～100倍，但本药单独使用时易产生耐药性，多与磺胺类药合用。本品于单用时是抑菌药，与磺胺药合用时增效，甚至可以杀菌。如细菌对这两种药物单用时都是敏感的，则一药的亚抑菌浓度可降低另一药的MIC4～8倍以上。但增效作用在不同细菌或菌株是不同的。在淋球菌和变形杆菌有高度的协同作用。在大多数葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌、流感杆菌只协同4～8倍。产生最大协同的浓度为各自的MIC配合。也有一些菌株对两药均敏感，但不产生协同作用。如细菌对磺胺药耐药，只对本品敏感，一般说不能产生协同，仅相当于TMP单独起作用，如磺胺药的浓度很高，在体外可出现协同。这一点临床意义不大，因磺胺药用量过大很不安全，但对尿路感染可能有益，因磺胺药在尿中的浓度很高。例如，铜绿假单胞菌对磺胺药是中度耐药的，合用本品时可能产生协同抗菌作用。国内研究证明本品对多种抗生素均有增效作用。例如与四环素联合对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌的增效作用大于与磺胺甲噁唑联合；对耐药金黄色葡萄球菌，本品能增强青霉素、新青霉素Ⅱ和红霉素的作用；对铜绿假单胞菌能增强庆大霉素和卡那霉素的作用。但也有人认为不应将本品与四环素、多西环素、卡那霉素或庆大霉素合用，因为产生增效的菌株极少。国外报道本品增效作用明显的有化脓性链球菌、肠球菌、变形杆菌、克雷白菌、大肠杆菌和铜绿假单胞菌等。动物实验也证实能提高感染小鼠的生存率。对利福平或本品的耐药菌株也能增效。两药的常用量在患者体内可以达到增效的水平。磺胺药与多黏菌素对阴性杆菌有协同作用。加用本品更好。本品在治疗过程中细菌产生耐药性的目前尚不多见，约在10%左右。这可能是TMP常与磺胺药合用，对此二药均敏感的病原菌不易产耐药性的缘故。但只对TMP敏感的病原菌容易产生耐药性。在实验室内也证明阴性菌对TMP的耐药性发展很快，临床应用日久，耐药性也会增多。